Zellsortierung mittels Durchflusszytometrie ist eine spezielle Art der Durchflusszytometrie. Sie bietet eine Methode zum Sortieren einer heterogenen Mischung biologischer Zellen in zwei oder mehr Behälter, jeweils eine Zelle auf einmal, basierend auf den spezifischen Lichtstreuungs- und Fluoreszenzeigenschaften jeder Zelle. Die Zellsortierung kann lebende Zellen auf der Grundlage beliebiger Streuungen, Fluoreszenzsignale oder einer Kombination aus beidem trennen. Wir haben Erfahrung in der Trennung von lebenden und toten Zellen, von Zellen, die ein spezifisches Fluoreszenzprotein exprimieren, oder von Zellen, die einen spezifischen Oberflächenmarker oder einen Satz von Oberflächenmarkern exprimieren. Nach der Trennung können die Zellen kultiviert und/oder in jedem nachgeschalteten Assay verwendet werden. Wir haben auch erfolgreich mehrere Einzelzellklone erstellt, die verschiedene Ebenen spezifischer Proteine aus mehreren Zelllinien exprimieren. Wir arbeiten mit einem Partnerlabor zusammen, das über mehrere Durchflusszytometer zur Zellsortierung und jahrelange Erfahrung in der Sortierung von Zellen auf verschiedene Weise verfügt.
Labcorp kann Gewebe in Einzelzell-Suspensionen dissoziieren, indem es die mechanische Dissoziation mit dem enzymatischen Abbau der extrazellulären Matrix kombiniert, wodurch die strukturelle Integrität der Gewebe erhalten bleibt. Das Miltenyi Biotech-Dissoziationskit in Verbindung mit dem gentleMACS™ Okto-Dissoziator produziert eine schonende, schnelle und effektive Erzeugung von Einzelzell-Suspensionen aus primärem Tumorgewebe oder Xenotransplantaten von Menschen oder Mäusen. Der Assay wurde für eine hohe Ausbeute an Tumorzellen und tumorinfiltrierenden Lymphozyten (TIL) optimiert, wobei die Zelloberflächenepitope erhalten bleiben. Dissoziierte Zellen können anschließend kultiviert, für interne/externe Proteinmarker gefärbt, durch Zellsortierung isoliert oder in vielen anderen nachgeschalteten Assays verwendet werden. Bei anderen als Tumorgeweben verfügen die Durchflusszytometrie-Experten über langjährige Erfahrung mit der Dissoziation vieler verschiedener Gewebe wie Milz, Lymphknoten, Lunge und Haut.
Labcorp kann gefrorene Protein-Homogenate mit einer Vielzahl von Protease- und Phosphatase-Inhibitoren oder DNA-/RNA-Homogenate in TRIzol® oder RNAlater® liefern. Wir haben einen BeadBlaster™ 24 Mikrotubus-Homogenisierer, der eine breite Palette biologischer Proben vom Weichgewebe bis zum Knochen vollständig lysiert, zerkleinert und homogenisiert. Selbst die schwierigsten und resistentesten Proben werden vollständig homogenisiert. Der Röhrchenträger aus Edelstahl setzt bis zu 24 Proben einer optimierten Hochgeschwindigkeits-3D-Bewegung aus, die Hochenergiestöße zwischen den Proben und den Mikroperlen erzeugt, um Zellinhalte freizusetzen. Nach der Homogenisierung können die Proben zentrifugiert und der Überstand kann zur weiteren Verarbeitung gesammelt werden.
*Bezeichnet Dienstleistungen, die in validierten Partnerlabors ausgeführt werden
Weitere Standardtechniken sind verfügbar. Ebenfalls erhältlich sind maßgeschneiderte Assay-Entwicklungen, die den individuellen Wünschen unserer Kunden entsprechen.